类风湿性关节炎（RA）是一种慢性自身免疫性疾病，其特征是持续的滑膜炎症和关节破坏，主要由激活的纤维样滑膜细胞（FLS）驱动，这些细胞表现出对凋亡的抵抗、增生以及侵袭性行为，如迁移和侵袭。尽管疾病修饰抗风湿药物和生物制剂等治疗取得了进展，但许多患者对当前治疗的反应有限，这突显了对FLS激活分子机制理解的不足以及针对这些顽固细胞的靶向疗法的需求。表观遗传学领域的最新进展表明，RNA修饰参与RA发病机制，包括通过ALKBH5和FTO等酶介导的m6A改变，促进FLS炎症和侵袭性。METTL1与WDR4形成复合物，是m7G修饰的主要writer，传统上在tRNA和rRNA中研究，用于癌症和自身免疫疾病的作用。新兴证据表明，METTL1也调控mRNA内部m7G，影响如癌症转移和神经干细胞中的翻译，但其在如RA等自身免疫疾病中调控FLS功能的作用仍未探索。

 

 

2025年10月22日，中山大学附属第一医院许韩师/肖游君团队在《Annals of the Rheumatic Diseases》发表题为“METTL1-mediated internal m7G methylation of cathepsin B mRNA promotes synovial aggression in rheumatoid arthritis”的研究论文。该研究首次揭示类风湿关节炎患者滑膜中METTL1表达升高，通过介导CTSB（组织蛋白酶B）mRNA内部m7G甲基化修饰增强其翻译效率，进而促进滑膜成纤维样细胞迁移和侵袭能力，驱动关节破坏；研究团队通过体内实验证实，靶向抑制METTL1（通过杂合敲除或关节腔注射shRNA腺病毒）可显著减轻RA动物模型的关节炎症与骨破坏，表明靶向METTL1-m7G-CTSB轴有望成为抑制RA滑膜侵袭的新型治疗策略。

1.METTL1与内部m7G修饰在RA中异常升高

作者首先通过m7G dot blot分析，发现RA患者FLS中mRNA内部m7G修饰水平显著上调。进一步检测发现METTL1在RA FLS中mRNA和蛋白水平均上调。

且滑膜组织中的METTL1表达与DAS28-ESR（疾病活动度评分）呈正相关。体外实验证实，炎症因子TNF-α和IL-1β可时间依赖性地促进METTL1表达。

多重免疫荧光结果显示METTL1在滑膜衬层PDPN⁺THY1⁻和下衬层PDPN⁺THY1⁺ FLS中均有表达（H），而siRNA介导的METTL1敲低显著降低m7G修饰水平（I），提示METTL1是RA中m7G修饰的关键调控因子。

2. METTL1依赖酶活性促进FLS细胞骨架重排与侵袭 

研究使用基因敲低策略，通过siRNA（A）和shRNA（B）证实METTL1缺失显著抑制RA FLS的迁移和侵袭能力。慢病毒介导的METTL1过表达增强这些表型，但催化失活的METTL1突变体无此效果（C），证明其功能依赖于甲基转移酶活性。

IF结果显示METTL1敲低减少细胞伪足形成（F-actin/vinculin标记）(D)。机制上，METTL1调控MMP9（基质金属蛋白酶）的表达和分泌（E、F），但不影响细胞增殖、凋亡及炎症因子产生，表明METTL1特异性调控RA FLS的侵袭性表型而非一般炎症反应。

3. CTSB为METTL1介导m7G修饰的关键靶点

通过m7G的meRIP-seq测序（由表观生物提供），研究系统分析了对照组和METTL1敲低组RA FLS的全转录组m7G修饰图谱。测序数据显示m7G修饰富集于"GA"特征序列，主要分布于mRNA的3'UTR和CDS。

差异甲基化分析鉴定出41个m7G修饰改变的基因，其中CTSB在METTL1敲低后m7G修饰水平显著降低。

WB证实METTL1敲低降低CTSB蛋白表达，但不影响其mRNA水平和蛋白稳定性。m7G-RIP-qPCR进一步验证CTSB mRNA的m7G修饰减少。

通过Polysome profiling（多核糖体图谱）证实METTL1敲低特异性降低CTSB mRNA的翻译效率，而双荧光素酶报告基因实验则证实METTL1通过调控CTSB mRNA 5'UTR区域特定m7G位点(chr8:11868073)的修饰发挥这一作用(图3I)。

4. CTSB介导METTL1调控的RA FLS侵袭性

研究发现CTSB在RA FLS中高表达（A、B），且受炎症因子诱导。两种不同序列的siRNA有效敲低CTSB表达（C、D），显著抑制RA FLS迁移、侵袭能力(E)和伪足形成(F)，同时降低MMP9表达(G)。

Rescue assay结果表明，在METTL1敲低背景下过表达CTSB可有效逆转细胞侵袭能力的下降，证实CTSB是METTL1下游功能效应分子。这些结果揭示了METTL1-m7G-CTSB轴在调控RA滑膜病理侵袭性中的核心作用。

5. 靶向抑制METTL1改善关节炎动物模型病理表型

最后，研究采用两种互补策略评估METTL1的治疗潜力。首先，在CIA大鼠模型中通过关节腔注射METTL1-shRNA腺病毒（Adv-shMETTL1）进行局部干预，结果显示治疗组关节肿胀、踝关节周径和关节炎评分显著降低，Micro-CT分析证实骨侵蚀减轻，组织病理学评估显示滑膜炎症、骨侵蚀和软骨降解明显改善，同时滑膜中METTL1和CTSB表达同步下调。其次，在DTHA（延迟型超敏性关节炎）小鼠模型中，研究利用CRISPR/Cas9技术构建METTL1杂合敲除(METTL1⁺/⁻)小鼠，发现METTL1基因剂量减少同样能显著减轻关节炎严重程度。这些体内证据为靶向METTL1治疗RA提供了转化医学依据。