RNAm6A修饰免疫沉淀建库试剂盒：Epi™ m6A Immunoprecipitation Kit:
项目简介
N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine，m6A）是真核生物中mRNA上最丰富的RNA修饰，调控着超80%的RNA代谢过程。其在干细胞分化、肿瘤发生、神经退行性疾病等关键生物学过程中发挥分子开关作用。Epi™ m6A Immunoprecipitation Kit通过优化抗体-磁珠定向偶联策略，实现m6A抗体的高密度固定化，结合梯度洗脱体系和双链特异性纯化技术，可有效降低非特异性吸附，确保高效捕获m6A修饰片段。通过meRIP富集样本内的m6A修饰片段，富集下来的m6A修饰RNA片段通过RT-qPCR进行定量分析，获取m6A修饰水平信息。也可构建文库进行测序，绘制m6A图谱。
试剂盒信息
产品特点
产品特点
1. 超低起始量，适配微量样本
2. 高特异性m6A抗体，有效提升捕获效率
3. 优化的体系/条件/流程，操作简便
4. 适用多种细胞、组织类型，已产出多篇应用客户文章
技术应用
1. m6A修饰水平定量分析
2. 结合建库测序，绘制全转录组的m6A修饰图谱
3. 研究肿瘤、免疫等疾病的m6A修饰异常表达
4. m6A修饰通过影响RNA稳定性、剪接或翻译效率调控干细胞分化、细胞应激响应等生理/病理进程
NGS实测数据
RIP-seq与meRIP-seq整合分析（a，i）：发现YTHDF2直接结合并调控线粒体功能相关基因的m6A修饰
客户文章
1. Circulation：AVCAPIR通过调控m6A修饰促进主动脉瓣钙化的机制研究（DOI: 10.1161/CIRCULATIONAHA.123.065213）
研究通过piRNA测序、meRIP-seq等多组学以及功能实验等方法，揭示了新型piRNA（AVCAPIR）在钙化性主动脉瓣疾病（CAVD）中的促钙化作用，其中通过meRIP-seq发现AVCAPIR通过抑制FTO介导的CD36 mRNA去甲基化，增强其m6A修饰及稳定性，激活CD36/PCSK9通路，从而驱动主动脉瓣钙化进程。并通过meRIP-qPCR进行多项验证。
RIP-seq与meRIP-seq整合分析（a，i）：发现YTHDF2直接结合并调控线粒体功能相关基因的m6A修饰
2. Nat Commun：YTHDF2通过m6A修饰调控CD8 T细胞多功能性以增强抗肿瘤免疫（DOI: 10.1038/s41467-024-53997-6）
研究通过meRIP-seq、ATAC-seq、Ribo-seq等多组学方法，揭示了YTHDF2（m6A reader蛋白）通过调控CD8 T细胞中m6A修饰的靶RNA稳定性、线粒体代谢及染色质可及性，驱动其多功能性（如细胞因子分泌与代谢适应性），从而增强抗肿瘤免疫；其中，meRIP-seq发现YTHDF2直接结合并调控关键效应基因（如Stat5a、Rasgrp1）的m6A修饰，促进其翻译效率与T细胞持久性。
EsxB通过Mettl14抑制Nox2 mRNA的m6A甲基化
3. Cell Discov：结核分枝杆菌通过EsxB抑制METTL14介导的Nox2 mRNA m6A甲基化以削弱抗结核免疫（DOI: 10.1038/s41421-024-00653-4）
文章使用了meRIP-seq/qPCR、RIP-seq等方法，研究了结核分枝杆菌分泌蛋白EsxB如何通过抑制METTL14的磷酸化及m6A甲基化功能调控宿主免疫；研究人员使用meRIP-seq分析了未感染和H37Rv感染的巨噬细胞中的m6A甲基化图谱，发现Nox2 mRNA上的m6A修饰富集度较高。通过meRIP-qPCR，他们进一步验证了Mettl14敲低或敲除会显著降低结核分枝杆菌感染巨噬细胞中Nox2 mRNA的m6A修饰水平，并证实EsxB能抑制Nox2 mRNA的m6A甲基化。研究进一步发现EsxB通过阻断p38 MAPK介导的METTL14 Thr72位点磷酸化，抑制其与METTL3复合体形成及液-液相分离（LLPS），导致Nox2 mRNA稳定性下降、ROS产生减少，最终促进结核分枝杆菌的免疫逃逸与存活。
NK细胞效应分子的m6A修饰分析
4. Cancer Immunol Res：mTOR信号通过调控m6A RNA甲基化促进NK细胞激活和效应功能（DOI: 10.1158/2326-6066.CIR-23-0339）
这篇文章研究了mTOR信号在NK细胞激活中对m6A RNA修饰的调控作用。其中使用MeRIP-seq在全转录组水平系统性鉴定NK细胞激活过程中m6A修饰的动态变化，并针对关键效应分子基因（如Prf1和Gzmb）的特定m6A位点进行功能验证（meRIP-qPCR），研究发现mTORC1通过促进SAM合成驱动m6A甲基化，稳定效应分子mRNA，从而增强NK细胞的细胞毒性及抗肿瘤功能。